南京世研儀器設(shè)備有限公司歡迎您！我們是專業(yè)生產(chǎn)凝膠成像系統(tǒng)廠家，眾多用戶推薦品牌,歡迎選購咨詢！
全國服務(wù)熱線
133 7200 3365
熱點資訊
凝膠成像系統(tǒng)中蛋白質(zhì)電泳凝膠如何拍攝?蛋白質(zhì)凝膠電泳操作說明
發(fā)布時間: 2021-09-23 10:17:58 來源：凝膠成像 作者：凝膠成像廠家
閱讀：
凝膠成像系統(tǒng)中Western blot是一項在復(fù)雜樣本中檢測蛋白質(zhì)表達水平的技術(shù)，至今已有超過40年的歷史，并成為了蛋白質(zhì)研究中最常用的工具之一。在凝膠成像系統(tǒng)中中蛋白質(zhì)電泳凝膠如何拍攝?
在科學技術(shù)迅速發(fā)展的今天，凝膠電泳作為非常重要的科研實驗方法早已被廣泛應(yīng)用于蛋白和核酸的分離。而電泳圖像的采集、保存和相關(guān)處理分析主要依靠凝膠成像系統(tǒng)。凝膠成像系統(tǒng)中Western blot是一項在復(fù)雜樣本中檢測蛋白質(zhì)表達水平的技術(shù)，至今已有超過40年的歷史，并成為了蛋白質(zhì)研究中最常用的工具之一。在凝膠成像系統(tǒng)中中蛋白質(zhì)電泳凝膠如何拍攝?
蛋白質(zhì)凝膠電泳操作說明：
1、把上述處理的樣品按1:1(V/V)與2×SDS凝膠加樣緩沖液混合，100℃加熱3分鐘，使蛋白質(zhì)變性;
2、取出變性蛋白質(zhì)，立即放于冰上。樣品如粘稠可進行超聲對DNA進行剪切，以最大功率處理0.5～2分鐘應(yīng)能有效地將裂解液粘稠度降至可控水平(注意：此步驟一定要在冰上進行);
3、如有沉淀以10 000g將樣本4℃離心10分鐘，將上清液移至另一管中，棄去沉淀物;
4、計算使用Western印跡法檢測靶蛋白所需要的樣本量，一般Western印跡法技術(shù)檢測中等大小蛋白的檢出下限約為1～5ng。在厚0.75mm的SDS聚丙烯酰胺凝膠上，每個泳道可加樣100μg而不致過多;
5、 用玻璃微量進樣器按順序加樣，注意沿加樣孔底上樣，否則樣品容易漂走。加樣量不宜過多或過少，一般15～20ul為宜。沒上樣的加樣孔中加1?SDS凝膠加樣緩沖液;
6、用注射器排除兩玻璃板底部的氣泡，將電泳裝置接通電源(正極接下槽，負極接上槽)，凝膠上所加電壓為8v/cm,當溴酚藍前沿進入分離膠后，電壓可提高到15V/cm,繼續(xù)電泳直至溴酚藍到達分離膠底部(約4小時)，關(guān)閉電源;
7、從電泳裝置上卸下玻璃板，放入一瓷盤中，用一注射器吸取若干毫升電泳緩沖液，將針頭插入一玻璃板與凝膠之間，小心不要將凝膠刺破，沿玻璃板從左至右注入電泳緩沖液，將玻璃板與凝膠分開?？拷筮吳腥ヒ唤且詷嗣髂z的位置;
8、如不需做免疫檢測可直接用考馬斯亮藍染色。
http://www.holoyun.cn/news-gs/304.html以上就是凝膠成像系統(tǒng)中蛋白質(zhì)電泳凝膠如何拍攝的相關(guān)介紹，如果您還有什么疑問，歡迎致電世研客服電話了解咨詢。世研儀器完善的售后服務(wù)，嚴格的管理體系，良好的企業(yè)信譽，產(chǎn)品遍布全國各地。您有興趣，可以關(guān)注更多世研其他產(chǎn)品：化學發(fā)光成像系統(tǒng)，純水系統(tǒng)，遠程強聲定向系統(tǒng)等。歡迎新老客戶來電咨詢!
相關(guān)推薦
Copyright ? 南京世研儀器設(shè)備有限公司 版權(quán)所有 蘇ICP備17064509號
南京世研儀器是專業(yè)的國產(chǎn)全自動凝膠成像系統(tǒng)廠家，提供各類化學發(fā)光凝膠成像分析儀器，價格合理，歡迎咨詢！
全國服務(wù)電話：133 7200 3365 在線客服QQ：2147712637
公司地址：南京市棲霞區(qū)邁皋橋創(chuàng)業(yè)園科技研發(fā)基地寅春路18號-X588